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HiCAM高速像增強熒光相機用于斑馬魚心臟的高速活體成像技術

更新時間:2023-04-06 點擊次數:757
HiCAM飛速度像提升熒光攝像機使用在斑馬魚心理的飛速度活體激光散斑技能


在意大利巴德諾海姆的Max Planck心肺研發所,人類對斑馬魚的心力管設備展開了研發。斑馬魚的透明體度(圖1)還有其進行實驗強勢使其擁有身體心力管設備的志向正比3d模型。


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圖1 斑馬魚的手機照片。靈魂坐落在紅色的方塊內



是為了論述斑馬魚的血管流動性,赤紅組織癌細胞被熒光核蛋白質DsRed標記圖片。熒光的力度感受到映照在紅組織癌細胞上的熒光核蛋白質量的制約。不僅,光試射的定位是自由的,這進每一步減掉了到了單反的光量。低光力度不需留存現象,多曝料時來抓取足以的就一款常見的化解方案,這大部分被代替三維成像放置的昏暗正方體。同時,在轉動正方體上適用相等的方案會引起圖像文件發暗。


猜想一點活的斑馬魚,它的腎臟是在晃動的。斑馬魚的心率約為每15分鐘175次,或親近每秒3次。為了能讓捕獲心跳的每一家階段中,,須要較高的幀率,要不然形象會為田徑運動模湖而失幀。這一味著形象感應器器愈來愈不久地爆出在昏暗的熒光燈下。依據添加調動光的屈服強度來添加熒光燈的數目是不會可以的,因此這會傷害值食用魚。


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圖2 HiCAM繞城高速像提高熒光單反相機附在熒光顯微鏡上


實驗英文配置


用按裝有Lambert HiCAM高速的攝像頭模式的熒光顯微鏡對斑馬魚確定調查(圖2)。將魚緊固在凝膠的作用中,從左上方直曬。DsRed淀粉酶的熒光從紅細胞中產生。這樣光向各走向釋放,里面些許光以反而的走向穿入二氧化碳激光的激光切割光路。同時,熒光確認二色鏡被方向到照相機上,而不能被折射回泛光燈。其他散射的調動起光都被二色鏡折射。濾光片將快速清理其他的背景光,只電子散射紅細胞熒光產生光譜的光。


圖形傳紅外感應器測器器將拍攝打進的熒光。拍攝將以每秒數十萬或千余幀的幀率下做出,每幀的暴光日期用量級在幾毫秒到幾毫秒的一這部分。智能翻番ccd (emccd)傳紅外感應器測器器的光精確度度足夠的拍攝到微亮的熒光。但我們在全辯認率下只構建約100fps的幀率,這一般來說現在的應用軟件一般來說不夠的。而cmos傳紅外感應器測器器可不可以在更高一些的幀率下本職工作,在全辯認率下達到每秒千余幀。然后,在每幀較短的暴光日期內,一般的穩定CMOS傳紅外感應器測器器沒有統計足夠的的光量來達到合理可行的信噪比。


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圖3 斑馬魚心理中(畫像右側角)的紅神經細胞從一款 腔室被運載到下一款 腔室(1-3),并舉入及時脈(5)。那里提示的畫像是在間距25毫秒的具體情況下紀要的。用500us的曝出的時間以2000 fps的幀率確定紀要。


HiCAM快速路像資料熒光單反相機的優勢:


HiCAM迅速像強化熒光照像機通過將高速CMOS傳感器與圖像增強器相結合,實現了所需的光靈敏度和高幀率。圖像增強器將檢測到的光子數量提高了幾個數量級。這樣,就可以以每秒2000幀的速度記錄斑馬魚的血液流動。圖3顯示了斑馬魚心血管系統中紅細胞的流動情況。


HiCAM高速的像明顯增強熒光像機-高靈敏度,幀頻可達4000幀/秒,實時熒光顯微成像的理想選擇!


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